上一篇抗体基础知识介绍了IgG的可变区结构域(Fab区)具备特异性识别目标分子并结合的能力,使得抗体分子有潜力成为检测试剂。然而,想要成为一款有效的检测试剂,抗体在结合待检测分子的表面后,还需产生可被检测仪器识别的光信号或电信号。本章节将探讨以抗体为基础的常见免疫检测技术的基本原理。
免疫检测的基本原理
免疫检测的核心原理是抗原与抗体之间的特异性结合。抗原能够激活免疫系统,通常是外来分子或病原微生物的表面分子,而抗体则由免疫系统产生,用于识别并结合抗原。这种高度特异性的结合是免疫检测技术得以应用的基础。
信号放大原理
信号放大是免疫检测中的关键步骤,目的是通过提高信号强度来增强检测灵敏度。结合抗体的目标分子往往体积较小,难以通过肉眼直接观察,因此需要将这种结合信息转化为光信号或电信号。常见的信号放大机制包括色素反应、荧光信号放大和电化学信号放大的过程。
常见的检测标记物类型
不同的检测标记物在免疫检测中发挥重要作用。常见的标记物包括:
- 酶标记:常用酶如辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)通过催化底物反应生成可见色素,而上述过程简单且成本低,但环境因素较大。
- 荧光标记:利用荧光染料如FITC和Rhodamine来标记抗体,具有灵敏度高和多重检测优点,但需专用设备。
- 化学发光标记:通过化学反应产生光信号,灵敏度极高且信号稳定,亦需特殊设备。
- 电化学标记:通过检测电流或电压变化,适用于表面等离子共振(SPR)技术,具备快速检测优势,但操作复杂。
免疫检测的关键性能指标
评估免疫检测技术的性能时,灵敏度、特异性、准确性和重复性是四个重要指标:
- 灵敏度:能够检测到目标抗原的最低浓度,反映检测方法识别目标的能力。
- 特异性:区分目标抗原与非目标物质的能力,高特异性能有效减少假阳性率。
- 准确性:与真实值的一致性,不仅关乎抗原识别,也包括浓度定量的准确性。
- 重复性:在相同条件下多次检测相同样本的一致性,确保实验结果的稳定性。
总而言之,抗体及其检测标记物和检测仪器共同构成了免疫检测系统,而Z6·尊龙凯时在此领域提供众多优质蛋白、抗体以及各类ELISA检测试剂盒,涵盖小鼠、大鼠等多种物种,满足科研需求,确保高效可靠的检测性能。
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