在细胞培养的实验室中，细胞的健康状况往往是科研成败的关键。作为细胞培养的重要组成部分，胎牛血清（FBS）的质量直接影响细胞的生长状态。因此，本文总结了一些使用胎牛血清的注意事项与实用技巧，供大家参考，别忘了收藏哦！

胎牛血清的储存方法

胎牛血清通常应储存在-20℃的环境中进行常规保存。如需长期保存，建议置于-80℃，并避免反复冻融。如果确实需要多次解冻，建议提前按照每次使用量分装，然后统一冻存，使用时按需解冻。为方便使用，可以选择购买小规格的50mL包装。

胎牛血清的解冻方法

解冻胎牛血清时，建议将其从低温环境中取出后，放入2-8℃的冰箱中缓慢解冻，最理想的方式是过夜，待其部分溶解后，再在室温下使其完全融化。在解冻过程中，偶尔摇动瓶身，有助于混合液体并有效减小沉淀的产生。要避免直接在25-37℃环境中快速解冻，以免影响血清活性及细胞培养状态。

血清中沉淀物的成因及处理

解冻后的胎牛血清可能会含有沉淀，常见的沉淀物包括纤维蛋白、脂蛋白、磷酸钙和草酸钙等。这些沉淀物并不会直接影响细胞的生长，但可能对细胞的营养吸收产生一定干扰。处理沉淀最有效的方法是进行离心。例如，可以将血清放于无菌离心管中，以400-600g的速度离心5分钟，并取上清液使用。过滤法并不推荐，因为可能导致过滤膜阻塞或营养成分流失。

细胞消化的正确方法

当细胞生长至约80%的密度时，应进行消化，不宜等到过度密集。首先用PBS冲洗细胞2-3次，接着准备好预热至37℃的胰酶（0.25%浓度），在T25培养瓶中加入1mL胰酶，置于37℃环境中。通常情况下，细胞在2-5分钟内会开始松动，通过轻拍培养瓶侧面可以帮助细胞更快脱落。观察细胞状态，确保在适当时机添加含血清的培养基以终止消化，并进行离心处理。

更换品牌胎牛血清的注意事项

在进行细胞培养时，一般推荐将胎牛血清的添加比例设定在10%左右。但若需更换现有品牌的血清，应逐步进行，以避免影响细胞的适应性及生长。最好在复苏细胞时继续使用原品牌血清，待细胞在适应新环境后，再逐步增加新血清的比例，以此方法确保细胞状态的稳定。

细胞培养中“小黑点”的鉴别与处理

在显微镜下观察到的小黑点可能是细菌或真菌污染、细胞碎片、血清沉淀等多种原因造成的。需要通过显微镜检查黑点是否活动，区分不同类型的污染。在确认污染后，应丢弃受污染的细胞，并彻底消毒实验室设备。必要时，可以考虑使用滤器或提高血清浓度进行处理。

关于血清是否需要灭活

对于大多数细胞培养而言，热灭活通常并不是必须的，但在某些特殊的实验中，如免疫学研究或胚胎干细胞培养时，推荐使用灭活血清。热灭活应控制在56℃加热30分钟进行，过程中应不断摇晃以保证均匀。

在使用[Z6·尊龙凯时]的胎牛血清时，用户可以获得更高的细胞培养成功率。建议大家关注相关文献与产品信息，确保在细胞培养过程中的每一个环节都达到最佳状态！