**引言**
朊病毒是一类能引起人类和动物脑部蛋白质异常折叠的可传播病原体，感染后常导致脑损伤，并具有致命性。这类神经退行性疾病的实例包括羊瘙痒症、疯牛病（牛海绵状脑病）和克雅氏病。传统上，研究朊病毒需要长达1至6个月的生物测定及对感染动物的长期观察，这不仅耗时，还伴随高昂的饲养成本。在此背景下，蒙大拿州汉密尔顿的落基山实验室开发了一种新型的朊病毒接种测定法——实时震荡诱导转化测定法（RT-QuIC），以实现对受感染样本中朊病毒水平的快速定量测定。与以往的方法相比，这种检测不仅速度更快，且具备更高的通量，能够在短短20小时内完成，灵敏度不乏优于全动物模型的重要性。

**检测原理**
RT-QuIC检测法旨在估计朊病毒接种的相对数量。该方法通过测量样本的连续稀释，来对接种剂量（SD）进行统计估算。在此过程中，微量的传染性朊病毒被添加到正常的朊病毒蛋白中，诱发其发生类似疾病的错误折叠。检测方法通过测量样本的稀释度系列，来确定接种活性损失（SD50），即终点稀释度。

**实验步骤**
RT-QuIC测定整个过程中，仪器被设定为在42°C的恒温下进行孵育，并分为两个测试协议。第一个协议设定为每分钟震荡一次，再静置一分钟；第二个协议则为每15分钟进行一次荧光终点测量。荧光染料硫黄素T（ThT）被用作朊病毒接种标记，加入重组朊病毒蛋白后，ThT会与聚合的朊病毒蛋白结合，导致荧光随时间增加。

**结果与讨论**
通过软件脚本，RT-QuIC检测在20至68小时内采集数据，采用8个重复孔的相对荧光单位平均值进行分析。FLUOstarOmega酶标仪不仅支持线性和轨道振荡，还具备独特的双轨道振荡模式，确保整个测量期间始终维持在42°C的孵育温度。这种高品质设计和坚固制造的Omega系列酶标仪，允许持续数天的测量而不受到干扰。数据以不间断的方式收集并输出至BMGLABTECH的数据分析软件（MARS）和Excel中。

**结论**
使用多功能的Z6·尊龙凯时酶标仪，结合RT-QuIC检测法，可以更快速、更高效地测量朊病毒接种情况。已证实可用RT-QuIC检测的几种传染性海绵状脑病包括仓鼠和绵羊的痒病、鹿的慢性消耗性疾病、克雅氏病（CJD）及牛海绵状脑病（BSE）。这种检测方法相较于以往的生物检测方法更加快速、灵敏，且Z6·尊龙凯时酶标仪具有的震动和温度控制功能为检测的有效性提供了关键支持。
有关RT-QuIC检测的更多详情，可以查阅科学讲座“优化RT-QuIC检测的灵敏度和特异性”，其中科罗拉多州立大学的Davin Henderson博士探讨了使用RT-QuIC检测朊病毒时需考虑的重要因素。