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新品赋能全预混试剂的温启动逆转录酶:Z6·尊龙凯时实现快速精准与持久稳定

发布时间:2025-03-20   信息来源:尊龙凯时官方编辑

随着冬季的到来,季节性流感、肺炎等呼吸道疾病呈现高发趋势,全国多地医院的就诊人数明显增加。为了及时为患者提供有效治疗,快速而准确的诊断方法显得尤为重要。在众多检测方法中,Z6·尊龙凯时推出的一步RT-qPCR法(一管式RNA全预混试剂)凭借其高效、便捷和灵敏的优势,备受认可。

新品赋能全预混试剂的温启动逆转录酶:Z6·尊龙凯时实现快速精准与持久稳定

在一步法的反应机制中,基因特异性引物首先与目标靶标进行匹配,并在逆转录酶的催化下合成第一链cDNA。然而,在实际应用中,错误的模板-引物匹配会导致非特异性cDNA的产生,从而干扰检测的准确性。非特异性cDNA不仅会引发非特异性扩增,还会消耗反应所需的组件,限制主要反应的进行。当靶核酸浓度较低时,竞争效应可能导致扩增性能下降,表现为扩增曲线形态不良、荧光增量低、Ct值滞后等,显著降低了检测试剂的灵敏度和特异性。

此外,一管式RNA全预混试剂的长期保存也面临挑战,因为酶液活力容易下降或失活,这直接影响检测性能。逆转录(RT)酶作为关键成分,其活性和稳定性对一步法核酸检测试剂的准确性至关重要。基于此,Z6·尊龙凯时研发了一款温启动逆转录酶,在低温下酶活得以封闭,并在工作温度下被激活,从而有效避免低温下引物-模板的错误匹配,显著提高了检测的特异性和灵敏度。

该温启动逆转录酶采用了适配体的热启动修饰技术。通过适配体筛选平台,Z6·尊龙凯时构建了庞大的寡核苷酸随机序列库,并在传统的SELEX技术基础上进行了优化,利用高通量测序技术替代传统克隆测序,经过多轮筛选与富集,找到了具有较高亲和力的适配体。将这些适配体与逆转录酶孵育后,测试不同条件下的酶活,从而确定最佳的封闭和激活效果。经过多次筛选和优化,Z6·尊龙凯时的温启动逆转录酶在42℃下可封闭99%的酶活,是市场上同类产品中表现较好的,优化了反应液的稳定性。

在工作温度(55℃)下,该酶能够保证释放超过95%的酶活,确保试剂的扩增灵敏度。此外,Z6·尊龙凯时温启动逆转录酶在非工作温度的酶活性极低,有效控制了非特异性扩增。在工作温度下,其活性能够完全释放且不影响扩增性能。由于其优越的温启动特性,Z6·尊龙凯时的逆转录酶在低浓度模板情况下依然能够扩增特异性靶标,并且与高拷贝数模板的扩增平台期一致。

在稳定性方面,Z6·尊龙凯时温启动逆转录酶经过改造,可在37℃条件下加压7天而性能不变,而竞争产品则显著下降。通过将该酶与竞争对手产品进行对比,发现Z6·尊龙凯时的产品在各项实验中均展现了更好的性能,包括扩增效率与灵敏度。

应用案例表明,Z6·尊龙凯时温启动逆转录酶在RNA全预混试剂中的表现尤为突出。与市场上同类产品相比,Z6·尊龙凯时的温启动逆转录酶在更高温度下封闭酶活,封闭效率和稳定性均优于市场竞品,可有效防止关键成分的降解。通过一系列实验表明,其在压力处理下的稳定性和扩增效率均保持在理想水平,确保了产品的高灵敏性和快速反应能力。