Z6·尊龙凯时的实验原理是采用脂类染料（如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行预染。预染后，将血清置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。通电时，脂蛋白会向正极移动，并形成多个区带。

试剂与器材

1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：配置电极缓冲液。成分包括巴比/妥钠154 g，巴比/妥276 g，EDTA酸0.292 g，溶解后加水至1000 ml。

2. 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH 8.6）：用于凝胶缓冲液，包含三甲基氨基甲烷12.12 g，EDTA酸0.29 g，NaCl15.85 g，溶解后加水至1000 ml。

3. 琼脂糖凝胶：将琼脂糖0.45 g与三羟甲基氨基甲烷缓冲液50 ml和水50 ml加热至沸腾，待琼脂糖完全溶解后立即停止加热。

4. 挖槽工具：制作切口刀，刀口长15 mm，中央夹有机玻璃或木片，用螺丝固定，两刀片相距15 mm。挖槽小匙由直径15 mm的铜丝制成，约6 cm长，一端锤成扁平，用砂纸磨光。

5. 电泳槽和电泳仪：使用与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳相同的仪器。

操作步骤

1. 预染血清：在小试管中将血清0.2 ml和苏丹黑染色液0.2 ml混合，放入37℃水浴中染色30分钟，然后进行离心（2000转/分，约5分钟）。

2. 制备琼脂糖凝胶板：将已配置的0.45%琼脂糖凝胶在沸水中加热融化后，用吸管浇注到载玻片上，每片约25 ml，静置半小时让其凝固（高温时需延长时间，亦可放入冰箱数分钟加速凝固）。

3. 点加血清：在已凝固的琼脂糖凝胶板一端约2 cm处，使用切口刀片垂直切入凝胶，然后用铜丝小匙取出长方小条凝胶。用小片滤纸吸干小槽内的水分，使用血色素吸管吸取约15 μl预染好的血清，注入凝胶板的小槽中。

4. 电泳：将加过血清的凝胶板平行放入电泳槽中，样品应放置在阴极端。用三层纱布浸润巴比/妥缓冲液，紧密贴在凝胶板两端，纱布的另一端浸在电泳槽中的巴比/妥缓冲液（注意：不可以使用三羟甲基氨基甲烷缓冲液替代）。连接电源，电压设定为120~130V，每片电流为3~4 mA。经过15至55分钟的电泳后，可观察到分离的色带。

注意事项

1. 电泳样品须为新鲜空腹血清。

2. 每块凝胶上可平行制作两条小槽，以便添加两个样品。

3. 如果使用与小槽形状相同的有机玻璃片，在琼脂糖凝固前固定到适当位置，待凝固后取出有机玻璃片，凝胶板上即可留下小槽，不再需要挖槽。

4. 若需保存电泳样本，可将电泳后的凝胶板（连同玻片）放入清水中浸泡脱盐2小时，然后在约80℃的烘箱中烘干。

结果及临床意义

1. 正常人血清脂蛋白可见三条区带，从负极到正极分别为β-脂蛋白（最深）、前β-脂蛋白（最浅）和α-脂蛋白（稍深于前β-脂蛋白），原点处应无乳糜微粒。

2. 如果前β-脂蛋白的颜色比α-脂蛋白更深，结合血清甘油三酯明显升高且胆固醇正常或稍高，则可以诊断为Ⅳ型高脂蛋白血症。

3. 若β-脂蛋白区带明显染色加深，并伴随血清总胆固醇显著增高及甘油三酯正常，则为Ⅱa型；而若结合血清总胆固醇升高且前β-脂蛋白略溶解，则表现为Ⅱb型。

4. 结果显示β-和前β-区带分离不明显，连在一起称为“宽β区带”，伴随血清甘油三酯和胆固醇均升高，则可定为Ⅲ型。

5. 如果原点处出现乳糜微粒，而β和前β均正常或降低且结合血清甘油三酯显著升高，则可定为Ⅰ型。

请注意，Z6·尊龙凯时所销售产品仅供科研实验使用，禁止用于临床！