病毒污染是使用源自哺乳动物细胞系的生物技术产品的一种潜在风险。在生物制品的生产过程中，无论是在临床前非GMP阶段、临床GMP阶段还是商业化阶段，产品都可能受到内源性或外源性病毒的污染，从而对患者安全构成严重威胁。统计数据显示，在过去36年中，共报告了26起哺乳动物细胞培养物的病毒污染事件，这些事件发生在产品生命周期的各个阶段。因此，确保产品的病毒安全性成为行业监管与技术开发的核心关注点。

为保证这些产品在潜在病毒污染方面的安全性，监管机构要求进行病毒清除研究，以评估纯化过程在去除内源性和外源性病毒方面的能力。一般来说，下游工艺常通过柱层析和专门的病毒去除步骤（如低pH孵育、去污剂处理和纳滤）来实现病毒的减少。在此背景下，阴离子层析（Anion Exchange Chromatography, AEX）的病毒去除效果及其影响因素显得尤为重要。

在下游纯化工艺中，层析步骤不仅能有效去除工艺相关和产品相关的杂质，也是一种重要的病毒清除单元操作。其中，AEX常常被认为是病毒清除的关键步骤。当AEX应用于抗体类项目的纯化时，主要有两种模式：流穿模式（Flow Through Mode, FT）和结合-洗脱模式（Bind and Elute Mode, B/E）。

FT模式利用目标单抗与模型病毒等电点（pI）的差异。多数单抗在适宜的缓冲液条件下（pH 7.0~8.5，低电导率）带正电荷而流穿，而模型病毒（如X-MuLV pI~58，MVM pI~62）在此条件下带负电荷，通过与填料带正电荷的配基发生静电吸附而被去除。B/E模式则主要利用单抗与病毒之间结合力强度的差异，在特定条件下，单抗和病毒均可结合到填料上，但通过改变洗脱条件，可以选择性地洗脱单抗，病毒则保留在填料上。

大量数据库显示，FT模式 AEX 能有效去除包膜病毒和非包膜病毒，统计数据表明：约70%的AEX应用采用FT模式，30%采用B/E模式。FT模式在清除两种病毒时表现出较高的稳健性，且批次间变异性较低。而B/E模式的两种病毒清除能力则呈现出更高的批次间变异性。

复合模式层析填料结合了离子交换与疏水相互作用等多种机制，这种多模式的机制赋予了其独特的优势。首先，复合模式增强了缓冲液的兼容性，能够在更宽的pH值和电导率范围内有效运行；其次，在高盐条件下，复合模式 AEX 仍能保持优异的病毒去除效能，显示出更稳健的病毒清除能力。

病毒与介质之间的相互作用强度受多种因素的影响，包括病毒的等电点（pI）、溶液的pH值、盐浓度、单克隆抗体（mAb）的性质以及竞争物的存在等。研究表明，在适宜的操作参数范围内，单一模式 AEX 的病毒去除建议的pH值为70~85、电导率<10mS/cm和载量<100mg/ml，以确保稳健的病毒清除效果。

例如，在某项目中，针对多种包膜和非包膜病毒模型（如X-MuLV、MVM、PRV、Reo3），DiamondMIX-A展现出优秀的清除能力，LRV范围达到4-5.34 log。在高盐条件下，DiamondMIX-A对X-MuLV实现了显著的清除效果，证明其在高盐环境下的稳健性。

在下游纯化工艺中，各层析步骤在病毒清除方面的能力和稳健性存在差异。阴离子交换层析（AEX），尤其是流穿模式（FT），已被广泛证明是清除病毒的关键单元操作。然而，即使是通常被认为稳健的AEX步骤，其清除效果（特别是对细小病毒）也可能因目标mAb的特异性、工艺参数的选择而有所不同。

为了确保病毒清除的稳健性，操作必须在经过验证的参数范围内进行。此外，应选用代表性的模型病毒，并在工艺的最差条件下进行病毒清除研究，以充分证明该步骤能在各种潜在风险场景下提供可靠的病毒去除能力。结合Z6·尊龙凯时的创新技术，为生物医疗行业提供先进的病毒去除解决方案，确保产品安全性与合规性。